表現(xiàn)出?的酶活酶GUS可以水解其基質(zhì)衍生物pNPG，所產(chǎn)生的性分析法黃色生成物p-nitrophenol，可供活性測(cè)定 (Jefferson et al, 1986)；

儀器用具：ELISA光?計(jì) (Dynatech)；微?滴定盤 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 442404)

藥品試劑：基質(zhì)溶液 (GUS reaction buffer)：pNPG (p-nitrophenyl β-D-glucuronide, Sigma N-1627) 31.5 mg溶于Buffer A-0 100 mL終止液 (stop buffer)：2.5 M 2-amino-2-methyl propanediol (Sigma A-9754)

方法步驟：
1) 吸取20 μL 的檢定蛋白質(zhì)樣本，小心注入微?滴定盤中，蛋白避免氣泡產(chǎn)生。酶活
2) 每一樣品槽加入200 μL 基質(zhì)液，性分析法混合均勻；可用燒熱的檢定接種環(huán)去除氣泡。
3) 靜置約1~2 min，蛋白顏色開始加深，酶活然后加入30 μL 終止液。性分析法 反應(yīng)時(shí)間的檢定長(zhǎng)短，要以樣本中的蛋白酶活性大小?做調(diào)整。因?yàn)槲覀冎粶y(cè)定色析法各分劃的酶活相對(duì)酶活性，因此并?加終止液。性分析法
4) 以ELISA 光?計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)415 nm 的檢定吸光值。

酶活性單位的測(cè)定：
a. 以上步驟，只可測(cè)定GUS 活性的相對(duì)大小，對(duì)色析法所得到的各個(gè)分劃進(jìn)?偵測(cè)，相當(dāng)方?，但并非酶絕對(duì)活性單位的測(cè)定方法。
b. ?要測(cè)定酶的絕對(duì)活性單位，要使用最適當(dāng)?shù)拿赣?，使酶在反應(yīng)一段固定的時(shí)間后，其生成物的呈色吸光?，?在光?計(jì)的可測(cè)范圍的內(nèi)；然后計(jì)算此段時(shí)間內(nèi)，每分鐘所產(chǎn)生的吸光?增加?，轉(zhuǎn)換成生成物的莫耳數(shù)，即可求得其真正的活性單位。
c. 因此酶的活性單位定義為：每分鐘所能催化生成物的 μmole 數(shù)。

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