酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項
酶聯(lián)免疫試劑盒(Elisa)是酶聯(lián)免疫一種敏感性高,特異性強,試劑重復性好的盒操實驗診斷方法。
由于其試劑穩(wěn)定,作注易保存,意事操作簡便,酶聯(lián)免疫結(jié)果判斷較客觀等因素,試劑目前已廣 泛應用在免疫學檢驗的盒操各領(lǐng)域中。
試劑盒操作看似簡便,作注但要做到十分精準卻也是意事個技術(shù)活。它對實驗室操作 的酶聯(lián)免疫環(huán)境以及操作人員的操作的熟練程度有著較高的要求。 由于大部分的試劑試驗操作 步驟都是由實驗人員來完成的,人為的盒操誤差相對嚴重一些 。
再此本人結(jié)合了自己的作注工作實踐向大家分享一下酶聯(lián)免疫試劑盒操作時的注意事項。
實驗室的意事環(huán)境要干凈,防止空氣中的一些細菌或粉塵對實驗造成干擾。
一般的酶聯(lián)免疫試劑盒中的酶標抗體是以辣根過氧化物酶(HRP)進行標記 的。因此要求樣本不能含疊氮鈉(NaN3) ,因為 NaN3 是 HRP 的抑制劑。
如果樣本是血清,應該充分離心,不得有顆粒。 ? 試劑盒應在保質(zhì)期內(nèi)使用。不同批次的試劑盒中的溶液不得混用。
在進行酶聯(lián)免疫實驗之前,應該將試劑盒放置室溫平衡 30min 以上。
稀釋溶液時,應按照說明書的要求進行精確稀釋。盡量選用去離子水或雙蒸 水進行稀釋。
要正確使用移液器,吸取液體要精準,槍頭上不得留有氣泡。吸取不同的液 體時,要注意更換槍頭。
加樣時要懸臂加樣,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸。
建議所有的樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
孵育時需將微孔用封板膜或保鮮膜封好,防止水分的蒸發(fā)。且封板膜不得重 復使用。
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