日前，從N床結(jié)新銳公司Fate Therapeutics，細(xì)新臨型細(xì)公布了基于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）分化的胞療胞療自然殺傷（NK）細(xì)胞療法FT516和CAR-NK細(xì)胞療法FT596的最新臨床結(jié)果。
在1期臨床試驗(yàn)中，法最法復(fù)發(fā)/難治性B細(xì)胞淋巴瘤患者接受了單劑FT596、即用或單劑FT596與單劑抗CD20抗體rituximab抗體構(gòu)成的從N床結(jié)組合療法的治療。截至今年6月25日，細(xì)新臨型細(xì)10名接受單一NK細(xì)胞療法和10名接受組合療法治療的胞療胞療患者可以接受評估。
試驗(yàn)結(jié)果顯示，法最法在接受FT596劑量超過9000萬細(xì)胞的即用14名患者中，10名（71%）患者獲得客觀緩解，從N床結(jié)其中7名（50%）獲得完全緩解。細(xì)新臨型細(xì)在此前未接受過靶向CD19的胞療胞療CAR-T療法治療的患者中，客觀緩解率為80%（8/10）。法最法在曾經(jīng)接受過CD19 CAR-T療法治療的即用4名患者中，2名（50%）獲得完全緩解。
▲FT596的1期臨床試驗(yàn)中期結(jié)果（圖片來源：Fate Therapeutics官網(wǎng)）
此外，F(xiàn)T596療法表現(xiàn)出良好的耐受性，在試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)劑量限制毒性，也未發(fā)現(xiàn)任何級別的免疫效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)神經(jīng)毒性和移植物抗宿主病（GVHD）。試驗(yàn)中報(bào)告兩例低級別細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）。
值得一提的是，這款CAR-NK細(xì)胞不是從癌癥患者體內(nèi)獲取NK細(xì)胞，在體外通過基因工程改造而生成的自體細(xì)胞療法。而是使用從健康供體獲得的iPSC分化生成的同種異體細(xì)胞療法。同種異體細(xì)胞療法正在成為多家新銳公司細(xì)胞療法的開發(fā)方向。
同種異體細(xì)胞療法的優(yōu)勢
同種異體細(xì)胞療法的生產(chǎn)方式是從健康供體中獲得T細(xì)胞或其它細(xì)胞類型，在體外進(jìn)行基因工程改造和擴(kuò)增，進(jìn)行質(zhì)量檢測之后冰凍庫存。它的優(yōu)點(diǎn)在于一名健康供體提供的細(xì)胞就可以生成大量細(xì)胞療法，滿足多個患者的需求。例如，致力于開發(fā)同種異體細(xì)胞療法的Allogene Therapeutics公司表示，從1名健康供體中獲得的細(xì)胞可以生產(chǎn)治療100名癌癥患者的CAR-T療法。
因?yàn)檫@些細(xì)胞可以提前生產(chǎn)并且冷凍在庫存中，需要接受治療的患者只需要解凍庫存的療法就可以立即接受治療，消除了自體CAR-T療法制造過程中產(chǎn)生的延遲。
而且，通常癌癥患者由于自身T細(xì)胞數(shù)量的限制，無法接受多次CAR-T療法的治療。而同種異體療法可以更容易重復(fù)對患者進(jìn)行治療。
另一些公司的同種異體細(xì)胞療法更進(jìn)一步，使用的是從健康供體中獲得的iPSC細(xì)胞。這些細(xì)胞在接受基因工程改造之后，可以生成能夠分化為CAR-T療法或者CAR-NK療法的iPSC細(xì)胞系。iPSC細(xì)胞具有強(qiáng)大的自我復(fù)制能力，因此可以提供一個不斷再生的細(xì)胞來源，從而生產(chǎn)具有高度一致性的“即用型”細(xì)胞療法。
目前，Allogene Therapeutics公司，Shoreline Biosciences公司，以及上面提到的Fate Therapeutics等新銳公司都在開發(fā)基于iPSC細(xì)胞分化生成的“即用型”細(xì)胞療法。
▲Fate Therapeutics公司的即用型NK細(xì)胞和T細(xì)胞生產(chǎn)流程（圖片來源：參考資料[4]）
同種異體細(xì)胞療法的療效持久性是需要解決的挑戰(zhàn)
雖然同種異體細(xì)胞療法與自體細(xì)胞療法相比具有多種優(yōu)勢，但是它們也需要面對獨(dú)特的挑戰(zhàn)。由于療法來自異體細(xì)胞，輸入患者的異體細(xì)胞可能對宿主細(xì)胞進(jìn)行攻擊，導(dǎo)致危及患者生命的GVHD。而且，異體細(xì)胞可能被宿主的免疫細(xì)胞識別并消滅，從而限制它們抗癌活性和療效的持久性。
以Fate Therapeutics公司的NK細(xì)胞療法FT516的最新結(jié)果為例，接受FT516治療的11名患者在接受治療３個月后有８名患者獲得緩解，其中包括６名完全緩解的患者。然而在接受治療６個月后，8名獲得緩解的患者中有３名患者出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)或者需要接受其它抗癌療法。
▲FT516的１期臨床試驗(yàn)中期結(jié)果（圖片來源：Fate Therapeutics公司官網(wǎng)）
改善同種異體細(xì)胞療法持久性的策略
針對同種異體細(xì)胞療法因?yàn)榛颊叩拿庖吲懦夥磻?yīng)而療效降低或持久性下降的問題，目前這一領(lǐng)域的解決策略沿著下面的幾個方向進(jìn)行：
更為有效的淋巴細(xì)胞清除手段
已有的研究已經(jīng)表明，想讓輸入的細(xì)胞療法在患者體內(nèi)增殖，需要在輸入細(xì)胞之前先使用化療等手段清除患者體內(nèi)已有的淋巴細(xì)胞，從而為輸入的細(xì)胞療法提供增殖的空間。對于同種異體細(xì)胞療法來說，清除淋巴細(xì)胞這一步可能更為重要，因?yàn)闅埓娴乃拗鱐細(xì)胞會立刻攻擊“外來”的細(xì)胞療法。
目前一種在研方法是通過基因編輯讓同種異體的細(xì)胞療法對清除T細(xì)胞的藥物產(chǎn)生抗性，這些細(xì)胞就不會受到清除T細(xì)胞藥物的影響。例如，Allogene公司開發(fā)的UCART19使用基因編輯手段，敲除了細(xì)胞表達(dá)CD52蛋白的基因。這讓這些細(xì)胞對通過與CD52相結(jié)合，殺死T細(xì)胞的單克隆抗體alemtuzumab產(chǎn)生抗性。將alemtuzumab與化療聯(lián)用可以更有效地清除宿主的成熟T細(xì)胞，并且將宿主的成熟T細(xì)胞維持在低水平。與此同時，同種異體的CAR-T療法仍然可以發(fā)揮作用。
▲通過抑制CAR-T細(xì)胞中CD52蛋白的表達(dá)提高CAR-T持久性的策略（圖片來源：Allogene官網(wǎng)）
基因編輯還可以讓同種異體的細(xì)胞療法對清除T細(xì)胞的化療藥物產(chǎn)生抗性，從而讓它們在抑制T細(xì)胞生長的環(huán)境中正常工作。然而，這一策略的弊端在于患者體內(nèi)的內(nèi)源T細(xì)胞水平會被壓制到很低的水平，導(dǎo)致他們感染的風(fēng)險(xiǎn)顯著提高。
降低同種異體細(xì)胞的免疫原性
器官移植和造血干細(xì)胞移植的經(jīng)驗(yàn)表明，如果供體的主要人類白細(xì)胞抗原（HLA）表型與宿主的HLA表型相似，就可以大幅度減少對移植物的免疫排斥。基于這一經(jīng)驗(yàn)，理論上可以通過發(fā)現(xiàn)具有特定HLA表型的供體，構(gòu)建供體細(xì)胞庫，從中選擇與患者匹配的供體細(xì)胞生成同種異體細(xì)胞。
由于1類HLA蛋白是介導(dǎo)免疫排斥因素的關(guān)鍵分子。另一種策略是使用基因工程手段，消除同種異體細(xì)胞表面表達(dá)的1類HLA蛋白。HLA在細(xì)胞表面的表達(dá)需要名為β2-microglobulin的亞基，通過基因工程敲除β2-microglobulin的表達(dá)就可以防止HLA蛋白在細(xì)胞表面的表達(dá)，從而降低這些細(xì)胞的免疫原性。
▲HLA結(jié)構(gòu)（圖片來源：User atropos235 on en.wikipedia [CC BY-SA (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/)]）
改善同種異體細(xì)胞的健康和持久性
除了降低同種異體細(xì)胞的免疫原性之外，多家新銳公司也在采取不同的策略，提高細(xì)胞療法本身的健康水平和持久性。例如，近日獲得1.72億美元B輪融資的Wugen公司通過其獨(dú)特的細(xì)胞培養(yǎng)方法，生成稱為“記憶NK細(xì)胞”（memory NK cell）的細(xì)胞療法，它們與傳統(tǒng)NK細(xì)胞相比，具有增強(qiáng)的腫瘤殺傷功能和體內(nèi)持久性。
▲通用型記憶NK細(xì)胞平臺作用機(jī)理（圖片來源：Wugen公司官網(wǎng)）
而近日與Kite公司達(dá)成合作的 Shoreline Biosciences公司則使用基因編輯技術(shù)，通過敲除NK細(xì)胞中的CISH基因的表達(dá)，提高細(xì)胞的持久性。CRISPR基因編輯技術(shù)具有一次性對細(xì)胞療法的基因組進(jìn)行多種修改的潛力。
▲Shoreline公司通過基因編輯改進(jìn)NK細(xì)胞的功能和持久性（圖片來源：Shoreline公司官網(wǎng)）
同種異體細(xì)胞療法的未來
許多人相信，同種異體細(xì)胞療法能夠解決自體療法難以制備，生產(chǎn)周期長的痛點(diǎn)，為全球更多病患帶來治療的新希望。在2020年藥明康德全球論壇上，德克薩斯大學(xué)MD安德森癌癥中心癌癥醫(yī)學(xué)分部負(fù)責(zé)人Patrick Hwu博士表示，在B細(xì)胞淋巴瘤等某些比較敏感的癌癥中，由于T細(xì)胞無需在腫瘤附近停留很久，“即用型”細(xì)胞療法可以帶來快速緩解，而不必過于擔(dān)心排斥反應(yīng)。
而且即用型療法可以重復(fù)給藥的特性，也可以一定程度上彌補(bǔ)它的持久性問題。
不過，Lyell Immunopharma的創(chuàng)始人兼首席執(zhí)行官Rick Klausner博士指出，目前“即用型”細(xì)胞療法研發(fā)的動力之一，在于當(dāng)下制造自體CAR-T療法的種種瓶頸。然而我們需要認(rèn)識到，當(dāng)下制造CAR-T療法的技術(shù)遠(yuǎn)未臻成熟。5-10年后，細(xì)胞療法的研發(fā)與生產(chǎn)制造勢必將與現(xiàn)在大不一樣。
在未來，如果我們能分離出T細(xì)胞中真正具有療效的細(xì)胞亞群，就能大幅降低治療癌癥所需的細(xì)胞數(shù)目。這能極大地減少我們所需培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，并把細(xì)胞療法的生產(chǎn)時間從數(shù)周縮短到短短幾天。
最終我們要知道，同種異體和自體細(xì)胞療法并不是對立的選擇。很多目前用于提高細(xì)胞療法效果的研究，不管是尋求更有效的細(xì)胞類型，還是使用基因編輯對細(xì)胞的基因組進(jìn)行改造以提高療法的持久性，對兩類細(xì)胞療法的開發(fā)都可以產(chǎn)生積極作用。
Richard Klausner博士曾表示，“科學(xué)發(fā)展無止盡，我們需要認(rèn)識到創(chuàng)新之美。當(dāng)下，我們對細(xì)胞療法的了解還不多，未來，細(xì)胞療法必將不可同日而語。”
參考資料：
[1] Fate Therapeutics Announces Positive Interim Clinical Data from its FT596 and FT516 Off-the-shelf, iPSC-derived NK Cell Programs for B-cell Lymphoma. Retrieved August 20, 2021, from https://ir.fatetherapeutics.com/news-releases/news-release-details/fate-therapeutics-announces-positive-interim-clinical-data-its
[2] Caldwell et al., (2021). Allogeneic CAR Cell Therapy—More Than a Pipe Dream. Front Immunol., doi: 10.3389/fimmu.2020.618427
[3] Fate delivers, up to a point. Retrieved August 20, 2021, from https://www.evaluate.com/vantage/articles/news/trial-results/fate-delivers-point
[4] Fate Therapeutics Corporate Presentation. Retrieved August 20, 2021, from https://ir.fatetherapeutics.com/static-files/726ecee3-28ab-4276-a7dd-885544972a16
[5] Vivier et al., (2008). Functions of natural killer cells. Nature Immunology, https://doi.org/10.1038/ni1582
來源：新浪醫(yī)藥。▽關(guān)注【藥明康德】微信公眾號
