“在免疫學領域,研究疫反極大的療過細胞異質性已被廣泛認識,但相應的單細工作還進行的很少。”- Mario Roederer,胞免Ph.D.
在這篇文章里,研究疫反Roederer和他的療過團隊提出了一種在BioMark平臺使用多重TaqMan試劑對單個T細胞進行分析的方法。首先,單細使用BD FACSAria™,胞免根據細胞的研究疫反標記將其分離以得到單細胞。接下來,療過Roederer細化其方法學,單細確保獲得足量的胞免RNA以進行單細胞的表達譜分析。Roederer等展示了低至一個mRNA轉錄本的研究疫反檢測極限(limit of detection, LOD),結果表明BioMark的療過高靈敏度和寬的動態范圍,可以檢測單細胞當量的單細mRNA。
該團隊在單細胞水平監測了T細胞的激活,發現了群體中CD4+細胞的亞群。實際上,CD4+細胞表達類似CSCR5/CCL5和DPPR/TIA1這樣的基因是稀有事件,并非之前使用大量mRNA觀察到的是普遍事件
通過比較CD154+和CD154- T細胞對葡萄球菌腸毒素B(SEB, Staphlyococcal enterotoxin B)的反應,(細胞)的異質性被進一步確立。當被刺激時,分析顯示有一組基因和T細胞的激活強烈相關,但是,只有5-20%的T細胞擁有可以結合SEB的受體Vβ鏈變體。
在這項研究中,細胞異質性被證明有很強的免疫相關性。Roederer和他的團隊正繼續推進系統的、單細胞的方法以更好地理解中樞免疫系統中細胞和分子的相互作用。
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