光學顯微鏡對于科學技術(shù)發(fā)展起到了不可忽視的再度推動作用，科學技術(shù)的揭開鏡實不斷發(fā)展同樣對光學顯微鏡分辨率提出了越來越高的要求。然而，微觀維活傳統(tǒng)光學顯微鏡受阿貝衍射極限的世界限制，白光下所能達到的顯微現(xiàn)高細胞最高分辨率僅為約200~300納米，制約了人類對于微觀世界的成像進一步探索。
由傅里葉光學理論可知，再度傳統(tǒng)光學顯微鏡無法突破衍射極限的揭開鏡實原因是攜帶被觀測樣品表面高頻信息的倏逝波在垂直于樣品方向上傳播時振幅呈指數(shù)衰減，導致細節(jié)信息無法遠距離傳播。微觀維活人們始終在搜尋一種能夠放大和增強最微小細節(jié)的顯微鏡。
超分辨率顯微鏡是一種突破衍射極限的方法，該極限是限制光學分辨率在約250納米左右的物理障礙。這已經(jīng)通過多種顯微鏡技術(shù)的發(fā)展實現(xiàn)，包括結(jié)構(gòu)化照明和受激發(fā)射抑制(STED)等。雖然這些系統(tǒng)可以在納米尺度上進行分子特性的表征，但大多數(shù)病理學科依賴電子顯微鏡(EM)的分辨率，因為超分辨率技術(shù)被認為不夠經(jīng)濟高效，并且在某些情況下可能不便于使用。
超分辨率徑向波動(SRRF)提供了一種與基于LED系統(tǒng)兼容的增強光學分辨率的開源方法。通過基于局部徑向?qū)ΨQ性和時間波動的逐步處理，SRRF通過一個時間序列能夠生成一幅在60-150納米范圍內(nèi)具有增強分辨率的單一圖像。然而迄今為止，SRRF主要在實驗性細胞生物學領(lǐng)域應用較多，因為與EM相比，它提供的分辨率范圍在臨床病理學上并沒有顯著的優(yōu)勢。
近日，萄牙古爾本基安科學研究所的科學家利用增強型超分辨率徑向波動(eSRRF)，實現(xiàn)了高保真3D活細胞納米鏡檢查，其能以大約每秒1單位體積的驚人速度捕捉活細胞的快照。
eSRRF是一種猶如“魔杖”般的升級版超分辨率顯微鏡，將顯微成像帶到了一個新水平，為底層結(jié)構(gòu)和分辨率提供了增強的保真度。eSRRF具有自動數(shù)據(jù)驅(qū)動的參數(shù)優(yōu)化功能。它確定了重建所需的最佳幀數(shù)量，為科學家提供了輕松高效的成像體驗。
不僅如此，eSRRF的設(shè)計具有用戶友好性，可與各種顯微技術(shù)和生物系統(tǒng)無縫集成，因此研究人員可以無技術(shù)障礙地探索微觀領(lǐng)域。此外，eSRRF通過與多焦點顯微鏡合作超越維度，引領(lǐng)了3D超分辨率時代。
eSRRF為活細胞成像開辟了新的可能性。eSRRF不僅僅是為了提高圖像分辨率，更是能夠讓研究人員能基于定量的圖像質(zhì)量測量來優(yōu)化結(jié)果。新方法也為研究人員提供了一種動態(tài)工具，讓看不見的東西變得可見。
提高光學顯微鏡的分辨率極限始終是研究者的關(guān)注焦點之一。eSRRF可以放大和增強最微小的細節(jié)，揭示出一個超出傳統(tǒng)分辨率限制的世界。我們可以期待，eSRRF為從生物學到醫(yī)學的多個領(lǐng)域帶來革命性的變化。
(資料參考來源：科技日報)
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